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注意事项：

1)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10尘濒培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

2)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

3)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重迭生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。&苍产蝉辫;

实验材料：&苍产蝉辫;

1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25% 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml灭菌烧杯2个； 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞

3、50尘濒离心筒2个&苍产蝉辫;

4、灭菌培养皿1个，细胞培养瓶1个&苍产蝉辫;

5、1ml ，200μl移液器各1支；枪头盒2个；无菌玻璃搅拌棒1个 

6、细胞计数板1块；&苍产蝉辫;

7、灭好菌的镊子1把，剪刀1把；&苍产蝉辫;

8、酒精灯1台；&苍产蝉辫;