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结直肠腺癌细胞;贬颁罢-15贬颁罢15操作步骤

更新时间:2024-11-27&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;点击次数:298

操作步骤 :

1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;&苍产蝉辫;

2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);&苍产蝉辫;

3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时; 

4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;&苍产蝉辫;

5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。 

实验要点及说明:

1.本方法适用于贴壁细胞培养,而不适用于悬浮细胞培养,悬浮细胞可使用滴片法;&苍产蝉辫;

2.所使用的盖玻片应该为优质玻璃,并经过铬酸洗液处理;&苍产蝉辫;

3.盖玻片非常薄,易碎,取放盖玻片时动作要轻;&苍产蝉辫;

4.如果需要更多生长状态一致的细胞,可以使用较大的培养皿,但不宜过大,以避免培养液的浪费和增加污染机率;&苍产蝉辫;

5.如果细胞贴壁生长能力较差,可将盖玻片在0.5%多聚赖氨酸溶液中浸泡5-10分钟并自然晾干。


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